CellWorld細胞凍存液的儲存條件
溫度:CellWorld細胞凍存液通常需要在-20℃避光條件下儲存,以確保其穩(wěn)定性和有效期(一般為24個月)。在初次融化后,若未使用完畢,可在2~8℃避光條件下保存至少1個月,少量蛋白析出不影響凍存效果。
容器:CellWorld細胞凍存液通常以50ml/瓶的規(guī)格提供,應確保容器密封良好,避免污染。
使用方法
細胞準備:
在凍存前,請確保細胞處于對數(shù)生長期,這是細胞凍存的最佳時期。
移除舊培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞兩次,以去除殘留的血清和代謝產(chǎn)物。
使用胰酶消化細胞,制備成細胞懸液。
細胞計數(shù)與凍存液配制:
對細胞懸液進行計數(shù),以確定細胞總數(shù)和所需細胞凍存液的量。
細胞的凍存密度通常建議為1×107 cells/mL。
根據(jù)細胞數(shù)量,計算出所需的細胞凍存液體積。
細胞凍存:
將細胞懸液轉(zhuǎn)移至適當?shù)碾x心管中,進行離心以收集細胞。
棄去上清液,加入適量的CellWorld細胞凍存液,輕輕吹打以重懸細胞。
將細胞懸液分裝至無菌細胞凍存管中,每管通常含1~10×10^6 cells/mL。
密封并標記凍存管,注明細胞名稱、代數(shù)、日期等信息。
按照常規(guī)操作流程,將凍存管依次置于4℃、-20℃、-80℃進行逐級降溫,或直接置于-80℃冰箱中儲存至少一年;或者-80℃過夜后,次日將細胞投入液氮中長期儲存。在液氮中,細胞可保存數(shù)年或更長時間。
注意事項:
在整個凍存過程中,請盡量在冰袋附近操作,以保持低溫環(huán)境,避免保護劑對細胞造成損傷。
請確保細胞凍存管密封,避免在復蘇過程中因壓力變化導致凍存管炸裂。
在取用凍存液時,應在超凈工作臺內(nèi)無菌操作,確保無菌條件。
復蘇細胞時,應從液氮罐或-80℃冰箱中迅速取出凍存管,立即放入37℃水浴中快速解凍,避免冰晶重新結(jié)晶而造成細胞死亡。
CellWorld細胞凍存液以其高效、穩(wěn)定、方便的特點,為細胞保存提供了可靠的解決方案。在使用時,請嚴格按照上述方法和注意事項進行操作,以確保細胞的存活率和穩(wěn)定性。